生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)三篇
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)篇一：生物醫(yī)學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告
生物醫(yī)學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告
學(xué)院（系）：
年級(jí)專(zhuān)業(yè)：
學(xué)號(hào)：
學(xué)生姓名：
實(shí)驗(yàn)一脈搏信號(hào)采集功能
I.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1.掌握檢測(cè)脈搏傳感器特性和使用方法。
2.掌握正向、
反向放大電路的應(yīng)用。
3.掌握脈搏測(cè)量的硬件電路原理。
4.掌握表征脈搏參數(shù)波形及特征點(diǎn)的識(shí)別方法。
II.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
通過(guò)脈搏傳感器將信號(hào)外接進(jìn)入本系統(tǒng)，檢測(cè)人體脈搏信號(hào)經(jīng)單片機(jī)處理以后，其信號(hào)波形可以LCD上實(shí)時(shí)顯示、或者由PC顯示。
拓展內(nèi)容：對(duì)輸入的脈搏信號(hào)進(jìn)行處理，計(jì)算脈率。
III.實(shí)驗(yàn)器材
1.示波器
2.脈搏傳感器
IV.實(shí)驗(yàn)步驟
脈搏功能測(cè)試電路布局如下：
1.電路的調(diào)試：
I.第一級(jí)運(yùn)放的調(diào)試與計(jì)算：把示波器的探頭一端與E20連接，另一端接GND。通電，不接外部傳感器，觀察示波器顯示的信號(hào)。如信號(hào)不在“0V”時(shí)，通過(guò)調(diào)節(jié)旋轉(zhuǎn)電位器RP5，同時(shí)觀察示波器顯示的信號(hào)的變化，直至示波器的信號(hào)在“0V”時(shí)，停止調(diào)節(jié)電位器RP5。之后，關(guān)電取下示波器的探頭；
II.
低通的選擇與計(jì)算：此脈搏功能模塊在低通濾波部分設(shè)置了“10Hz低通
濾波”“1KHz低通濾波”兩大部分，可以通過(guò)連線選擇其中的一種。
選擇操作如下：
a.10Hz低通濾波：
第一、把示波器的探頭一端與E21連接，另一端接GND；
第二、通過(guò)實(shí)驗(yàn)導(dǎo)線把P1與P2相連接；
第三、通電；
第四、脈搏傳感器與J1正確連接。觀察示波器顯示的波形。
b.1KHz低通濾波：
第一、把示波器的探頭一端與E22連接，另一端接GND；
第二、通過(guò)實(shí)驗(yàn)導(dǎo)線把P1與P3相連接；
第三、通電；
第四、脈搏傳感器與J1正確連接。觀察示波器顯示的波形。
III.放大倍數(shù)的調(diào)試與計(jì)算：此脈搏功能模塊的放大倍數(shù)是通過(guò)旋轉(zhuǎn)電位器
RP7來(lái)實(shí)現(xiàn)的。在I、II的基礎(chǔ)上來(lái)實(shí)現(xiàn)以下功能。
選擇操作如下：
第一、把示波器的探頭一端與E23連接，另一端接GND；
第二、根據(jù)低通濾波來(lái)決定具體的連線。選擇了“10Hz低通濾波”，通過(guò)實(shí)驗(yàn)導(dǎo)線把P4與P6相連接；選擇了“1KHz低通濾波”，通過(guò)實(shí)驗(yàn)導(dǎo)線把P5與P6相連接。
第三、P9、P7相連，P8、P26相連；
第四、脈搏傳感器與J1正確連接；
第五、通電；
第六、旋轉(zhuǎn)電位器RP7同時(shí)觀察示波器顯示的波形是否有變化。實(shí)驗(yàn)操作如下：斷電，P9、P7斷開(kāi)，萬(wàn)用表電阻檔的的兩支表筆分別與P7
和P8相連，調(diào)節(jié)RP7同時(shí)觀察萬(wàn)用表顯示的電阻值，當(dāng)達(dá)到計(jì)算的電阻值后，停止調(diào)節(jié)電位器，再根據(jù)III.在示波器的顯示波形，同時(shí)記錄表格：IV.50Hz陷波電路陷波電路的描述：交流電網(wǎng)頻率為50Hz(美國(guó)、日本為
60Hz)，因此人們又將電網(wǎng)產(chǎn)生的50Hz干擾稱(chēng)為工頻干擾。由于工頻干擾頻率處在EMG信號(hào)能量集中的頻段，不能簡(jiǎn)單地用高通或低通濾波器將其濾除。為了壓制50Hz的工頻干擾，要在儀器的信號(hào)調(diào)理部分采用陷波電路。
50Hz與直通的選擇：a.50Hz的選通：P10與P19相連；
b.直通的選通：P10與P21相連。
置K18的NO.1于ON，其它于OFF。
在I、II、III的基礎(chǔ)上來(lái)實(shí)現(xiàn)以下功能：
?把示波器的探頭一端與E44連接，另一端接GND；
?分別觀察示波器顯示的波形的區(qū)別。
V.在I、II、III、IV的基礎(chǔ)上，置K18的NO.3于ON。信號(hào)到達(dá)模數(shù)轉(zhuǎn)
換芯片U2；
通過(guò)按鍵“2”、“A”選擇“脈搏信號(hào)采集”項(xiàng)，按確認(rèn)鍵“6”后，進(jìn)入LCD上實(shí)時(shí)顯示波形。退出此功能按返回鍵“1”，顯示界面就退回到主界面。V.實(shí)驗(yàn)原理
一、脈搏傳感器
該產(chǎn)品采用高度集成化工藝將力敏元件(PVDF壓電膜)、靈敏度溫度補(bǔ)償元件、感溫元件、信號(hào)調(diào)理電路電路集成在傳感器內(nèi)。脈搏波動(dòng)一次輸出一正脈沖。該產(chǎn)品用于脈率檢測(cè)，主要用于運(yùn)動(dòng)、健身器材中的心率測(cè)試。
主要特點(diǎn)：
1、靈敏度高。
2、抗干擾性能強(qiáng)。
3、過(guò)載能力大。
4、一致性好，性能穩(wěn)定可靠，使用壽命長(zhǎng)。
技術(shù)指標(biāo)：
電源電壓：3～12VDC
壓力量程：-50～+300mmHg
過(guò)載：100倍
輸出高電平：大于VCC-1.5V
輸出低電平：小于0.2V
二、前級(jí)放大模塊：
在一般信號(hào)放大的應(yīng)用中通常只要通過(guò)差動(dòng)放大電路即可滿(mǎn)足需求，然而基本的差動(dòng)放大電路精密度較差，且差動(dòng)放大電路上變更放大增益時(shí)，必須調(diào)整兩個(gè)電阻，影響整個(gè)信號(hào)放大精確度的變因就更加復(fù)雜。
三、原理圖
圖1前端放大電路
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)篇二：醫(yī)學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)及習(xí)題整理
<醫(yī)學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)>整理
1.常用的吸量管有：
奧氏吸量管、移液管、刻度吸量管
4.如何正確使用吸量管？
答：(1)選用原則：就近原則
(2)吸量管的使用：吸-擦-調(diào)-放
5.如何正確使用微量加樣器？
答：轉(zhuǎn)-按-吸-擦-按
6.如何正確使用離心機(jī)？
放置-裝管-平衡-啟動(dòng)-取出
二、主要實(shí)驗(yàn)方法原理
1.分光光度法基本原理是什么？
答：不同物質(zhì)由于其分子結(jié)構(gòu)不同，對(duì)不同波長(zhǎng)光線的吸收能力也不同，因此每種物質(zhì)都具有其特異的吸收光譜，在一定條件下，其吸收程度與該物質(zhì)濃度成正比，故可利用各種物質(zhì)的不同的吸收光譜特征及其強(qiáng)度,對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性和定量的分析。分光光度法常被用來(lái)測(cè)定溶液中存在的光吸收物質(zhì)的濃度，其基本原理是根據(jù)Lambert和Beer定律。該定律闡明了溶液對(duì)單色光吸收的多少與溶液濃度及溶液厚度之間的關(guān)系。
2.利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量測(cè)定的方法主要有哪兩種？
答：直接比較法（公式法）、標(biāo)準(zhǔn)曲線法
3.層析法基本原理是什么？
答：層析法就是利用混合物在經(jīng)過(guò)固定相和流動(dòng)相兩相的過(guò)程中，其中的待分離物質(zhì)在不同的兩相中不斷地進(jìn)行交換、分配、吸附及解吸附等過(guò)程，由于混合物中各組分間在理化性質(zhì)如吸附力、分子形狀和大小、分子極性、分子親和力、分配系數(shù)等方面存在著差異，因此當(dāng)它們經(jīng)過(guò)上述相同重復(fù)過(guò)程時(shí)，各自的情況就會(huì)有所不同從而使各物質(zhì)得以分離。
4.常用的層析法有哪幾種？
答：薄層層析、離子交換層析、凝膠層析、親和層析。
5.離子交換劑的作用原理是什么？
答：①陽(yáng)離子交換劑吸附陽(yáng)離子；②陰離子交換劑吸附陰離子；
當(dāng)離子結(jié)合到固定相交換基團(tuán)上以后，用提高流動(dòng)相中離子強(qiáng)度或改變pH的辦法，把它們從離子交換劑上依次洗脫下來(lái)，達(dá)到分離純化的目的。
6.凝膠層析的作用原理是什么？
答：分子篩
7．親和層析的作用原理是什么？
答：親和層析是以能與生物分子進(jìn)行特異結(jié)合的配基作為固定相，對(duì)混合物中某一生物分子進(jìn)行高效分離純化的層析技術(shù)。
9.影響電泳的主要因素是什么？
答：
(1)電泳溶液的pH值|:當(dāng)溶液的pH值等于某種兩性電解質(zhì)的等電點(diǎn)時(shí)，不帶電荷。當(dāng)溶液pH小于其等電點(diǎn)時(shí)，則呈正離子狀態(tài)，移向負(fù)極；反之，溶液pH值大于其等電點(diǎn)時(shí)，則呈負(fù)離子狀態(tài)，移向正極。
(2)緩沖液的離子強(qiáng)度:離子強(qiáng)度低，電泳速度快，分離區(qū)帶不易清晰；離子強(qiáng)度高，電泳速度慢，但區(qū)帶分離清晰。常用離子強(qiáng)度為0.02~0.2。
(3)電場(chǎng)強(qiáng)度:電泳速度和電場(chǎng)強(qiáng)度成正比關(guān)系。電場(chǎng)強(qiáng)度愈高，則帶電粒子的移動(dòng)愈快，但電壓增加，相應(yīng)電流也增大，電流過(guò)大時(shí)易產(chǎn)生熱效應(yīng),可使介質(zhì)中溶液蒸發(fā)及生物樣品
變性。
(4)電滲作用:如紙上電泳蛋白質(zhì)移動(dòng)的方向與電滲現(xiàn)象相反，則實(shí)際上蛋白質(zhì)泳動(dòng)的距離，等于電泳移動(dòng)距離減去電滲距離。如電泳方向和電滲方向一致，其蛋白質(zhì)移動(dòng)距離，等于二者相加。電滲現(xiàn)象所造成的移動(dòng)距離可用不帶電的有色染料或有色葡聚糖點(diǎn)在支持物的中間，觀察電滲方向和距離。
10.區(qū)帶電泳分幾類(lèi)？
2．按支持物的裝置形式不同，可分為：①平板式電泳；②垂直板式電泳；③垂直管狀電泳。
3．按pH值的連續(xù)性不同，可分為：①連續(xù)pH電泳：電泳的全部過(guò)程中緩沖液pH值保持不變；②不連續(xù)pH電泳：緩沖液與支持物之間有不同的pH值，能使分離物質(zhì)的區(qū)帶更加清晰。不連續(xù)與連續(xù)電泳的主要區(qū)別在于前者有兩層不同孔徑的凝膠系統(tǒng)；電極槽中及兩層凝膠中所用的緩沖液pH值不同；電泳過(guò)程中形成的電位梯度亦不均勻。而后者在這三個(gè)方面都是單一或是均勻的。
11.離心技術(shù)基本原理是什么？
低速6000r/min高速25000r/min超速
答：離心基本原理是根據(jù)物質(zhì)沉降系數(shù)、質(zhì)量、浮力因子等不同，利用離心機(jī)產(chǎn)生強(qiáng)大離心力來(lái)分離具有不同沉降系數(shù)的物質(zhì)。沉降系數(shù)是微顆粒在離心力場(chǎng)的作用下，從靜止?fàn)顟B(tài)到到達(dá)極限速度所需要的時(shí)間。其單位用S表示，1S=1×10-13秒。它反映的是單位離心力做用下顆粒沉降的速度。
12．常用的離心分離方法有哪些？原理是什么？
答：1．差速離心法：不同的離心速度，由低速到高速分階段離心，將不同顆粒大小的微粒分批沉降析出，留取所需成分。
2．密度梯度離心法：樣品溶液在密度梯度介質(zhì)中進(jìn)行離心沉降，在一定的離心力作用下把各組分的顆粒分配到梯度液中相應(yīng)位置上，形成不同區(qū)帶的分離方法。
3．超速離心法：超速離心法多用于亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的分離制備和生物大分子的制備。目前轉(zhuǎn)速已達(dá)85000r／min以上。生物大分子在超離心力場(chǎng)作用下，離心力大于分子擴(kuò)散力，生物大分子便逐漸沉降。分子量和分子形狀不同，其沉降的速度就不同，因此而被分離。離心分離是利用離心力將懸浮液中的懸浮微粒快速沉降，借以分離比重不同的各種物質(zhì)成分的方法，是實(shí)驗(yàn)室分離提取生物分子常規(guī)采用的技術(shù)之一。
17.細(xì)胞培養(yǎng)必需設(shè)備有哪些？
答：細(xì)胞培養(yǎng)必需設(shè)備有超凈工作臺(tái)、CO2培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、液氮生物容器、壓力蒸汽消毒器、無(wú)菌過(guò)濾器、電熱干燥箱、離心機(jī)、細(xì)胞計(jì)數(shù)板和冰箱等。
18.無(wú)菌操作技術(shù)包括哪些內(nèi)容?
答：1.保持安靜、整潔的無(wú)菌工作區(qū)域;2.保持干凈整潔的工作面;3.注意個(gè)人衛(wèi)生；4.在潔凈工作臺(tái)內(nèi)無(wú)菌操作
實(shí)驗(yàn)一貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
1.何謂貼壁細(xì)胞？
答：貼壁細(xì)胞又稱(chēng)錨著依賴(lài)性細(xì)胞，是指賴(lài)于貼附在培養(yǎng)器皿表面生長(zhǎng)的細(xì)胞，大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞屬于此類(lèi)。細(xì)胞附著或貼附于底物表面上，呈現(xiàn)出極性細(xì)胞的典型形態(tài)過(guò)程，稱(chēng)為貼壁。貼壁是貼附類(lèi)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的條件之一。
2.貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)原理是什么？
答：細(xì)胞的貼壁是通過(guò)特異的細(xì)胞表面受體與細(xì)胞外基質(zhì)分子結(jié)合而實(shí)現(xiàn)的，細(xì)胞在鋪展之前，細(xì)胞已分泌了細(xì)胞外基質(zhì)和蛋白聚糖。細(xì)胞外基質(zhì)先粘著在帶電荷的培養(yǎng)基質(zhì)上，然后，細(xì)胞再通過(guò)特異的受體附著到基質(zhì)上。蛋白酶可消化細(xì)胞外基質(zhì)，甚至通過(guò)降解跨膜蛋白的胞外區(qū)使單層培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞彼此分離。上皮細(xì)胞一般不易解離，因?yàn)樗鼈兺ㄟ^(guò)緊密連
接復(fù)合體使細(xì)胞結(jié)合在一起；間充質(zhì)間結(jié)合則更多地依賴(lài)基質(zhì)的作用，因此容易分離。
3．細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法是什么？
n/4*104*稀釋倍數(shù)
4．怎樣鑒別死、活細(xì)胞？
臺(tái)盼藍(lán)染色法”。
5.怎樣進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)？
答：低倍鏡下按一定方向逐格計(jì)數(shù)板內(nèi)四個(gè)角的每格大格中的呈透亮的.細(xì)胞數(shù)。若細(xì)胞正好壓在格線上，則按數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右的原則計(jì)數(shù)。
實(shí)驗(yàn)二細(xì)胞標(biāo)本的制備與形態(tài)觀察
蟾蜍軟骨細(xì)胞、中性紅染料、高爾基體粉紅色
實(shí)驗(yàn)三細(xì)胞無(wú)絲分裂和有絲分裂
1．馬蛔蟲(chóng)子宮切片有何特征？
子宮腔內(nèi)充滿(mǎn)處于有絲分裂不同時(shí)期受精卵細(xì)胞。每個(gè)受精卵細(xì)胞由厚膜包圍，呈灰色。受精卵細(xì)胞在膜內(nèi)進(jìn)行分裂，此膜只在發(fā)育早期緊貼細(xì)胞質(zhì)，在較晚期膜與分裂球之間有清亮的間隙，這是由于分裂球收縮而形成的。
實(shí)驗(yàn)四亞細(xì)胞組分的分離及觀察鑒定
1.亞細(xì)胞組分的分離及觀察鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是什么？
答：將懸浮液靜止不動(dòng)時(shí)，由于重力場(chǎng)的作用，懸浮的顆粒就要逐漸地沉降下來(lái)，顆粒越重，下沉越快，反之則上浮。但是顆粒在重力場(chǎng)中的沉降速度并不只是與它的質(zhì)量有關(guān)，還與它的密度、大小和形狀有關(guān)，此外還與介質(zhì)溶液的粘度等因素有關(guān)。但是當(dāng)顆粒的大小小于幾個(gè)微米時(shí)，它沉降的速度很慢，而擴(kuò)散現(xiàn)象非常嚴(yán)重，所以不能僅依靠重力場(chǎng)來(lái)觀察它們的沉降速度，必須利用高速離心的方法，產(chǎn)生出強(qiáng)大的離心力場(chǎng)，于是就產(chǎn)生了超速離心、分級(jí)分離的技術(shù)。細(xì)胞內(nèi)不同結(jié)構(gòu)的比重、大小和形態(tài)都不相同，在同一離心場(chǎng)內(nèi)的沉降速度也不相同。根據(jù)這一原理，常用不同轉(zhuǎn)速的離心法，將細(xì)胞內(nèi)各種亞細(xì)胞組分分級(jí)分離出來(lái)。沉降速度：細(xì)胞核>線粒體>微粒體
2.為什么本實(shí)驗(yàn)要在低溫下操作？
答：防止亞細(xì)胞在分離的過(guò)程中被破壞。
3.用冷玻片滴片有何意義？
答：利于細(xì)胞、亞細(xì)胞較牢固地貼于片上。
4、線粒體染色：詹納斯綠
細(xì)胞核染色：甲基綠-派洛寧
5、永久制片觀察：
蘇木精染色，深藍(lán)色線狀物或顆粒物為線粒體
鍍銀染色：深棕色網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)為高爾基體
第三版塊生物大分子的分析方法實(shí)驗(yàn)一
生物分子在細(xì)胞內(nèi)分布的分析
1.Feulgen反應(yīng)的原理是什么？
答：DNA是遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)，主要存在于細(xì)胞核中，在60℃HCl水解作用下，DNA分子中脫氧核糖的C-1’與膘吟堿基形成的糖苷鍵斷裂，在脫氧核糖的C-1’上暴露出游離醛基，醛基與Schiff氏試劑（無(wú)色亞硫酸品紅液）反應(yīng)形成紫紅色化合物。這是DNA特有的顯色反應(yīng)；稱(chēng)為福爾根（Feulgen）反應(yīng)。
亮綠染細(xì)胞質(zhì)，呈綠色。
3.實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的問(wèn)題是什么？
答：1.水解的時(shí)間不宜太長(zhǎng)或太短水浴溫度要保持60℃以上，以保證充分水解以及染液能
夠正常著色。
2.亮綠復(fù)染的時(shí)間不能太久，宜保持在lmin以?xún)?nèi)，以避免細(xì)胞核也被染成綠色。
4.乳酸脫氫酶在細(xì)胞內(nèi)定位的分析實(shí)驗(yàn)原理是什么？
答：乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase存在于細(xì)胞胞質(zhì)中，在NAD+存在的情況下，可催化乳酸氧化脫氫為丙酮酸，反應(yīng)中底物分子脫下的氫由乳酸脫氫酶的輔酶NAD+接受，還原為NADH+H+，NADH+H+可將氫通過(guò)受氫體吩嗪硫酸甲酯(phenazinemethosulfate,PMS)供給四唑鹽，將其還原為藍(lán)紫色的雙甲臜沉淀，因此在細(xì)胞內(nèi)存在酶活性的部位將呈現(xiàn)藍(lán)紫色的沉淀。
5.PAS反應(yīng)定性分析糖原在細(xì)胞中定位的原理是什么？
答：糖原是動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)貯存能量的多糖物質(zhì)，在動(dòng)物的肝臟中尤為豐富。檢測(cè)糖原的一般方法為過(guò)碘酸希夫反應(yīng)。其原理是利用過(guò)碘酸將糖原氧化，把葡萄糖分子中2、3位碳原子間的鍵打斷，將其上的乙二醇變?yōu)槎┗�，后者與Schiff試劑反應(yīng)形成深玫瑰紅色化合物，從而顯示糖原。
6.蘇丹黑法分析脂類(lèi)在細(xì)胞中定位的原理是什么？
答：蘇丹黑染色法屬于脂溶性染料顯示法。蘇丹黑是一種脂溶性染料，可溶于脂類(lèi)從而使細(xì)胞中的脂類(lèi)顯示黑色。
7、甲基綠-派洛寧染DNARNA原理
甲基綠帶兩個(gè)正電荷染DNA呈藍(lán)綠色
派洛寧帶一個(gè)正電荷染RNA呈紅色
實(shí)驗(yàn)二蛋白質(zhì)含量的Folin-酚法測(cè)定
1．Folin-酚法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的原理是什么？
答：蛋白質(zhì)分子中含有帶酚基的酪氨酸(tyrosine)，在堿性條件下其肽鏈與Cu2+螯合，形成蛋白質(zhì)-銅復(fù)合物，此復(fù)合物中酪氨酸極易使酚試劑中的磷鉬酸-磷鎢酸還原，生成藍(lán)色化合物，藍(lán)色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。利用藍(lán)色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比的關(guān)系可繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或用公式，求得樣品中蛋白質(zhì)含量。
2．Lambert和Beer定律闡述了什么？
答：該定律闡明了溶液對(duì)單色光吸收的多少與溶液濃度及溶液厚度之間的關(guān)系。
4．Folin-酚法測(cè)定蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的是什么？
答：各管加酚試劑后迅速搖勻，不應(yīng)出現(xiàn)混濁。
實(shí)驗(yàn)三血清γ-球蛋白的精細(xì)分離與純度鑒定
1．離子交換層析法分離純化蛋白質(zhì)的原理是什么？
答：血清中含有清蛋白（albumin）和各種球蛋白(α-、β-、γ-球蛋白)，經(jīng)初步分離提取可得含球蛋白的粗制品。球蛋白粗制品再用DEAE-纖維素柱層析法進(jìn)一步分離可純化出γ-球蛋白。DEAE-纖維素為陰離子交換劑（anionexchanger），在pH6.5條件下，帶有正電荷，能夠吸附帶負(fù)電荷的清蛋白、α-球蛋白和β-球蛋白(它們的pI分別為4.6、5.06和5.12)，而γ-球蛋白(pI為7.3)不與DEAE-纖維素結(jié)合，因而留在溶液中，此時(shí)收集所得即為進(jìn)一步純化的γ-球蛋白，純化的產(chǎn)物可用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定其純度。
2．離子交換層析法分離純化蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)步驟是什么？
答：1.DEAE-纖維素處理；2.裝柱;3．平衡；4.樣品上樣與洗脫收集；5.DEAE-纖維素的再生與保存。
3.如要測(cè)定某種蛋白質(zhì)的分子量，采用何種層析法最好？
答：如要測(cè)定某種蛋白質(zhì)的分子量，采用凝膠層析法最好
4.離子交換層析法分離純化蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的是什么？
答：1.由于乙酸銨是揮發(fā)性鹽類(lèi)，故溶液配制時(shí)不得加熱，配好后必須密封保存，以防pH
及濃度發(fā)生改變，否則會(huì)影響所分離的蛋白質(zhì)純度。
2.可用20％三氯乙酸溶液代替磺基水楊酸溶液來(lái)檢驗(yàn)洗脫液中有無(wú)蛋白質(zhì)。
3.用HCl處理DEAE-纖維素時(shí)，時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則DEAE-纖維素會(huì)發(fā)生變質(zhì)。
5.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定蛋白質(zhì)分離純度的原理是什么？
答：以聚丙烯酰胺凝膠作為載體
由丙烯酰胺和交聯(lián)劑N,N’-亞甲基雙丙烯酰胺聚合交聯(lián)而成。
引發(fā)劑是過(guò)硫酸銨，催化劑為四甲基乙二胺。
SDS是一種陰離子表面活性劑能打斷蛋白質(zhì)的氫鍵和疏水鍵，并按一定的比例和蛋白質(zhì)分子結(jié)合成復(fù)合物，使蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其本身原有的電荷，掩蓋了各種蛋白分子間天然的電荷差異。
還原劑β?巰基乙醇，它能破壞蛋白質(zhì)的二硫鍵，使蛋白質(zhì)的構(gòu)象和形狀改變，幾乎全部呈長(zhǎng)橢圓棒狀，
6.不連續(xù)凝膠電泳的支持體由什么組成？
答：由分離膠和濃縮膠組成。上層為濃縮膠，一般Acr為2％~3％，緩沖液為不同濃度的Tris-HCl、pH值為6.8左右；下層為分離膠，Acr為5％~10％，緩沖液常用Tris-HCl，pH值為8.8。上、下電泳槽盛有pH值為8.3的Tris-甘氨酸緩沖液，上電泳槽接電源的負(fù)極，下電泳槽接正極。
7．SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的是什么？
答：1）丙烯酰胺(Acr)和雙丙烯酰胺(Bis)有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性，最好戴手套、口罩。
2）不要用洗衣粉和刷子擦洗電泳平板玻璃板。
3）微量進(jìn)樣器針頭極易堵塞，吸樣后應(yīng)及時(shí)清洗；玻管中的金屬芯子不宜拔出，防止彎曲和弄臟。
4）吸取溶膠的滴管、吸管等，要立即排空和沖洗，以防凝固堵塞。
5）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，注意勿弄破平板玻璃。
8、指示劑：溴酚藍(lán)；染色劑：考馬斯亮藍(lán)；步驟：取樣、制膠、電泳、剝膠、染色
9、濃縮膠中遷移率：cl->蛋白質(zhì)->甘氨酸-
實(shí)驗(yàn)四堿性磷酸酶的Km值測(cè)定
1.堿性磷酸酶的Km值測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理是什么？
以磷酸苯二鈉為底物，由堿性磷酸酶催化水解，生成游離酚和磷酸鹽。酚在堿性條件下與4—氨基安替吡啉作用，經(jīng)鐵 氧化，生成紅色的醌衍生物，顏色深淺和酚的含量成正比。
2.請(qǐng)寫(xiě)出Michaelis-Menten方程
答：上式中Vmax為最大反應(yīng)速度，[S]為底物濃度，Km為米氏常數(shù)，而其中的V則表示反應(yīng)的起始速度。
2.何謂Km？
米氏常數(shù)是反應(yīng)速度等于最大反應(yīng)速度一半時(shí)底物的濃度。大多數(shù)酶的Km值在0.01~100mmol／L間。
5．實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的是什么？
答：1．血清取量要準(zhǔn)確。2．酚標(biāo)準(zhǔn)曲線必須是過(guò)原點(diǎn)的一條直線。
第五版塊生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
實(shí)驗(yàn)一血清谷-丙轉(zhuǎn)氨酶活性測(cè)定
1.血清谷-丙轉(zhuǎn)氨酶活性測(cè)定的原理是什么？
以丙氨酸和α-酮戊二酸為底物，在谷-丙轉(zhuǎn)氨酶作用下生成丙酮酸和谷氨酸，再利用顯色劑2，4-二硝基苯肼與丙酮酸反應(yīng)，生成丙酮酸二硝基苯腙。此化合物在堿性溶液中呈棕色
2.實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的是什么？
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)篇三：生物醫(yī)學(xué)信號(hào)實(shí)驗(yàn)資料
生物醫(yī)學(xué)信號(hào)分析和處理
實(shí)驗(yàn)一離散時(shí)間系統(tǒng)基本概念的Matlab仿真
一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1理解離散序列的定義、基本運(yùn)算及其計(jì)算機(jī)實(shí)現(xiàn)
2熟悉理想采樣的性質(zhì)，了解信號(hào)采樣前后的頻譜變化，加深對(duì)采樣定理的理解
3熟悉離散信號(hào)和系統(tǒng)的時(shí)域特性
4掌握線性卷積的計(jì)算機(jī)編程方法：利用卷積的方法，觀察、分析系統(tǒng)響應(yīng)的時(shí)域特性
二實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、步驟及結(jié)果
1、基本序列的計(jì)算機(jī)產(chǎn)生
�。�1）單位抽樣序列
�。�2）單位階躍序列
�。�3）兩個(gè)信號(hào)相加
�。�4）兩個(gè)信號(hào)相乘
（5）序列移位
2、利用基本序列產(chǎn)生給定序列并繪制圖形
x4(n)n
3、利用線性卷積完成線性系統(tǒng)的輸出
線性系統(tǒng)的輸出
4、線性時(shí)不變系統(tǒng)的差分方程
y1(n)
5、采樣頻率對(duì)頻域特性的影響
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